课程编号：（由研究生院统一完成）

课程名称： 细胞培养技术

英文名称：Introduction to Cell and Tissue Culture

课程类型：公共选修课

授课学时：18          理论课学时：         实验课学时：18

课程学分： 1.0

开课单位：生命科学学院细胞生物学教研室

开课时间：第一学年第一学期

主讲教师： 廖亚平、刘长青、付应霄、李姝婧、鲍明升、唐宝定等

授课对象： 硕士研究生

预修课程： 细胞生物学

课程简介：

细胞培养几乎就可以最直接、最简单、最准确地反映生命的各种活动规律，以及部分地提供在机体中发生的各种信息。本课程系统介绍了组织和细胞培养技术有关的概念，基本原理、操作程序和关键技术，及其在医学研究和临床实践中的应用。同时针对绝大多数学生对于实验技术和方法缺乏系统的训练，本课程为研究生提供亲自动手操作的实践机会，掌握组织细胞培养的基本操作，培养独立完成实验的能力。

一、课程性质、目的和任务：

该课程为统招硕士研究生公共选修课程，细胞培养技术实验是相关专业研究生教学过程中的重要环节，其目的是使学生通过实验掌握细胞培养实验的基本原理、基本方法与技术，巩固和加深对理论知识的理解。课程目的是培养学生独立进行科学研究的基本技能，提高学生的动手能力及分析问题、解决问题的能力，养成严谨的科学态度，为以后的工作打下坚实的研究基础。同时，在实验教学中把马克思主义立场观点方法的教育与科学精神的培养结合起来，注重科学思维方法的训练和科学伦理的教育，培养学生探索未知、追求真理、勇攀科学高峰的责任感和使命感；培养基本的科学思维能力，严谨的科学态度和作风。

 

二、教学内容及要求

 

实验一  细胞培养技术基础知识

 

1、类别：

综合性实验。

2、实验目的和要求：

（1）掌握细胞培养基本概念；细胞培养基本条件的建立方法。

（2）熟悉培养细胞生存环境和条件。

（3）了解细胞培养的基本原理和发展简史；介绍中国细胞生物学家事迹，激发学生科技报国的家国情怀和使命担当。

3、实验内容：

（1）细胞培养技术的概述

原代培养、传代培养、克隆等概念

（2）细胞培养的仪器设备

无菌条件，细胞生长条件，细胞检测条件，细胞保存条件

（3）培养细胞生长的条件

（4）细胞培养用液的配制

（5）培养器皿的清洗、包装与消毒

（6）冻存和复苏

4、学时：

4学时

 

实验二  动物细胞培养基本方法

 

1、类别：

综合性实验。

2、实验目的和要求：

（1）掌握原代培养概念；培养过程；传代培养概念；基本过程；细胞计数方法；冻存与复苏的具体过程。

（2）熟悉体外培养细胞的生长类型；体外培养基本方法；细胞培养染色方法；通过分析实例，提高学生正确认识问题、分析问题和解决问题的能力。

（3）了解体外培养技术的类别；原代培养细胞和传代培养细胞的生物学特点。

3、实验内容：

（1）动物细胞培养的基本知识

体外培养技术的类别；体外培养细胞的生长类型；培养细胞的生物学特点

原代培养细胞的特点；传代培养期细胞特点；原代培养物需要传代的指标

（2）原代培养过程

组织块培养方法步骤；消化分离细胞培养实验步骤

（3）传代培养的过程

贴壁细胞的传代过程；细胞计数与活力检测

（4）细胞计数方法

（5）细胞的冻存与复苏

（6）培养细胞观察

（7）污染的类别和检测

（8） 细胞培养应注意的细节问题

四、学时：

4学时

 

实验三  胎鼠细胞原代培养

1、类别：

综合性实验。

2、目的和要求：

（1）掌握动物细胞原代培养的原理及其方法。

（2）熟悉消化法培养和组织块培养法的基本操作步骤。

（3）掌握原代培养中取材、消化及细胞无菌培养等基本实验操作技术；科学伦理的教育，教导学生尊重和善待实验动物。

3、实验内容：

（1）处死胎鼠，取肾；

（2）剪碎，并用Hanks液洗涤；

（3）胰酶消化后加入新鲜培养液吹打悬浮细胞分散组织块；

（4）按血细胞计数法进行计数与稀释并分装与培养；

（5）观察细胞生长状况。

4、学时：

5学时

实验四  Hela细胞传代培养

1、类别：

综合性实验。

2、目的和要求：

（1）掌握细胞培养的基本方法和过程；各种细胞培养方法介绍，培养学生探索未知、追求真理、勇攀科学高峰的责任感和使命感；

（2）熟悉细胞培养的条件及细胞培养相关试剂的制备；

（3）熟悉离体培养条件下的动物细胞在形态、行为和生长过程中的特征性表现与变化；

（4）熟练掌握细胞计数板的使用方法。

3、实验内容：

（1） 消毒；

（2）弃去原有的培养液；

（3）胰酶消化后加入新鲜培养液吹打悬浮细胞；

（4） 稀释后细胞计数并分装；

（5）放入37℃CO₂培养箱中培养；

（6）第二天观察细胞生长情况。

4、学时：

5学时 

三、学时分配

专业、实验名称及学时分配

 

四、教学方式

讲授与实验相结合，讲授占30%左右时间，可采用线上或者线下授课，在教学中运用诱导式、互动式和启发式等教学方法，统一采用多媒体教学、网络教学、视频辅助等手段，提高教学效果；实验占70%，着眼于加强学生基本技能训练和观察分析问题及科学思维能力的培养，大多数实验要求学生自己动手操作。

五、考核方式

实验报告或作业和期末考试，考试形式为小综述撰写或思考题（开卷）。实验作业及平时成绩：30%，期末考试：70%

六、教材及主要参考书

教  材：《组织和细胞培养技术》（第3版），章静波编著，人民卫生出版社，2014年。

参考书：《细胞生物学实验指南》第3版，丁明孝编著，高等教育出版社，2020年。

 

七、大纲主要起草人、审阅人

主要起草人：细胞生物学教研室全体老师    2022年 4月 19日

审阅人：廖亚平                        2022年 4月 20日

 

 

                                                           生命科学学院  院（系）、部 细胞生物学 教研室

       2022年4月 20 日